En mai, après avoir attendu une réponse du Cardinal Giuliano Della Rovere, présent en qualité de Légat Pontifical à Avignon, le Très Saint-Père proclame la commise sur ses possessions dans le Latium. Ils saisissent les villas, palaces et autres appartements. Apprenant cela la garnison de la Rocca di Ostia se barricade dans la forteresse. On parle de cinquante hommes à pied, équipés d’une vingtaine d’arcs, de cinq arquebuses, d’une soixantaine d’épées et de lances et d’une bonne réserve de poudre.

L'armée Pontificale pose alors le siège devant la forteresse, et les 2 galères Romaines empêchent la forteresse d'être ravitaillée par le fleuve. Juan Borgia, qui dirige les troupes avec Niccolò di Pitigliano, demande au Gouverneur de la forteresse de se rendre et lui propose une place dans le gouvernement des Borgia. Il lui laisse alors 24h pour réfléchir.

Le Gouverneur de la forteresse refuse la proposition de Juan et maintient la garnison sur le qui-vive. L'armée qui mène le siège n'attaque pas dès les premiers jours. Ils installent simplement le siège et les deux commandants réfléchissent à une stratégie. Ils finissent par ordonner un assaut contre la forteresse en juin.

L'assaut est donc donné, et est particulièrement violent. Les Borgia perdent beaucoup d'hommes dans cette manœuvre, quoiqu'il parvienne à remporter la forteresse. Le Gouverneur est constitué prisonnier du Saint Père.

Pertes :

• 210 fantassins, 40 gardes corses et 1 canon de campagne pour les Borgia.
  
• Toute la garnison est hors de combat pour les Della Rovere.